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植物样品的采取、处理与保存

生化分析的准确性,除了取决于分析方法的选择是否合适以及一切分析工作是否严格按照要求进行外,很大程度上还取决于所采取样品是否具有最佳的代表性。 如果采样不遵循科学方法,样本就缺乏代表性,即使分析严谨、准确,也无法得出正确的结论。 因此,必须对样本的采集、处理和保存给予足够的重视。

从田间或试验田采集的样品一般数量较大,称为“原始样品”。 然后根据原始样本的类型(如根、茎、叶、花、果等)选择“平均样本”。 然后根据分析任务的要求和样本的特点,从平均样本中选出进行分析的“分析样本”。 可见,获取分析样品需要一系列复杂而细致的步骤,在实际工作中必须以高度的认真和负责的态度对待。

(1)原始样本和平均样本的采集、处理和保存

根据分析目的,采集原始样品和平均样品的方法有两种:一是混合采样进行质量鉴定;二是混合采样。 另一种是根据植物生长期取样

1、混合取样法:一般种子样品可采用混合取样法。 首先将代表一定区域的收获物脱粒,然后将其均匀地铺在木板或牛皮纸上。 然后将样本对角线分成4个三角形。 取两个相反的三角形样本,将消除的另外两个三角形样本相除。 如此进行,直到消除所需的数量。 这种取样方法称为“四分法”,用这种方法得到的平均样品在实验室经过适当处理后即可制成分析样品。

选择豆类和油料种子平均样本的方法与谷物种子相同。 注意样品中不应有未成熟的种子或污染物,并且不要将摇匀的种子添加到平均样品中。

如果直接从田间采集植物样品,且生长均匀,则可以沿对角线或等距离的平行直线取样。 如果植物生长不均匀,应根据生长的强弱按比例抽取5点左右的样品,然后混合。 每个采样点采集的植物数量因植物类型和采样时间而异。 对于密植作物如小麦或其他农作物苗木,可以按面积或成束采集样品(每束样品的植株数量根据需要而定)。 对于玉米和甘蔗等农作物,每个采样点一株植物就足够了。

在选取红薯、马铃薯、甜菜、萝卜等块根类块茎类平均样本时,必须注意大、中、小样本的比例。 然后纵向切取一部分(一半到四分之一)组织作为平均样本,否则不具有代表性。

一般蔬菜样品也是按照对角线法取样。 对于番茄样品,应选择簇位置相同、成熟度相同的果实,并取1/4的果实作为平均样本。

在对苹果、梨、桃子、柑橘等水果进行平均取样时,一般选取1~3棵果树作为代表。 从所有收获的植物中,选择大、中、小果实以及​​向阳和背阳部分的果实,并混合成平均样品。 样本。 对于葡萄等浆果,取样时可从不同地点的5~10株植株的各个部位取样,包括向阳面、背面、上下部分。

2、按生长期取样方法:在苗期取样,由于植株较小,因此取样的植株数量相对较多。 尽管各种作物有所不同,但总的原则是所取样品的干重应为分析用样品的干重的两倍。

随着植株年龄的增长,每次采集的植株数量也相应减少,但切不可单独采集植株作为样本。 每个生育期取样时均应进行观察和记录。

采样地点一般在边境地区,采样点周围不应有植物缺失。

取样后,根据分析目的分为根、茎、叶、穗等各个部分,然后捆扎、贴上标签,分别放入样品袋中。

果蔬采收后,由于水分含量高,容易发生霉变。 它们可以放在冰箱中冷藏,用于干燥和灭菌,或者用酒精处理或干燥用于分析。

(2) 分析样品的处理和保存

采集的新鲜植物样品如混有土壤,不宜用水冲洗。 可以用湿布擦拭,然后放在通风良好的地方风干或晾干。 干燥样品时,可将植物放入 80°C 烘箱中以停止酶活性并去除水分。 干燥样品时,注意温度不宜过高,以免烧焦植物。 最好不要在阳光下晒干,以免沾染灰尘或被风吹走。

整株植物样品应根据根、茎、叶、种子等进行分离。当必须切开果实时,使用锋利的不锈钢刀以防止汁液逸出。

为了避免糖、蛋白质、维生素等成分的损失,可采用真空干燥或冷冻真空干燥。 风干或烘干的样品根据其特性进行以下处理:

1、种子样品的处理:一般谷物种子的平均样品可用电动样品粉碎机粉碎。 机器内部必须事先清理干净。 最初粉碎的少量样品可以丢弃。 然后正式粉碎,使所有样品都通过一定目数的筛子。 混合均匀,按四分法取出一定量的样品细粉,作为分析样品。 ,贮存于干燥的磨口罐中,并贴有标签,标明名称、编号、采集地点、加工、取样日期和取样人姓名等。如需长期贮存,标签应涂上石蜡,并涂上石蜡。样品中应添加适当的防腐剂。

应将少量油料种子(例如蓖麻和芝麻)放入研钵中研磨,以避免脂质损失。

2.茎样品的处理:干燥的茎样品也应研磨。 用于破碎茎的破碎机与种子破碎机不同。 其切割部分由多对相反方向排列的刀片组成。 粉碎后的样品按上述方法保存。

3. 多汁样品的处理:一般多汁样品,如水果、蔬菜等,其化学成分(糖、蛋白质、维生素等)在储存过程中容易发生变化,因此常采用新鲜样品进行各种测量。 将他们的平均样本切成小块,放入电动组织捣碎器中,然后将其打成匀浆。 若样品含水量较少,则根据样品重量添加适量水,然后捣碎。 当样品量较少时,可用手持式均质器或研钵研磨。 必要时可在砂浆中加入少量石英砂。

如果被测物质不稳定(如某些维生素和酶等),则上述操作应在低温下进行。 如果样品匀浆不能及时测定,可暂时放入冰箱保存或灭菌后密封保存。

4. 丙酮干粉的制备:在分离、纯化或测定某种酶的活性时,丙酮干粉法是常用的有效方法之一。

该方法是将新鲜原料打成匀浆,放入布氏漏斗中,缓慢加入匀浆重量10倍的丙酮于低温冰箱中冷却至-15℃~-20℃,快速抽吸,过滤,然后用5冷丙酮洗涤3次,在室温下放置1小时左右,直至无丙酮气味,然后移至含有五氧化二磷的真空干燥器中干燥。 丙酮干粉的制备是在低温下完成的,丙酮干粉可以在低温冰箱中长期保存。 这种方法可以有效地从细胞中提取物质,去除脂质,避免脂质干扰,并使一些原本不溶的酶溶于水。

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